说明
一般描述
该试剂盒用于在免疫组化中使用光学显微镜检测并定量单细胞水平的细胞凋亡。
应用
该原位细胞死亡检测试剂盒, POD是一种精准、快速并简便的非放射性技术用于在细胞和组织中在单细胞水平对凋亡的细胞死亡进行检测和定量。因此，该原位细胞死亡检测试剂盒可用于多种不同的检测系统。
举例包括：在基础研究和日常病理检测中对冷冻及石蜡包埋福尔马林固定组织切片中独立的凋亡细胞进行检测[1][2]
在癌症研究和临床肿瘤学中对恶性细胞对药物诱导凋亡的敏感性进行测定[3]
通过双染过程对异质性细胞群中正在经历细胞死亡的细胞进行分析
特点和优势
灵敏：对凋亡细胞的标记（细胞染色）的最大强度高于切口平移法。
快速：使用荧光素dUTP，可以在TUNEL反应后直接分析样品，但必须在加入次级检测系统之前。
方便：使用荧光素dUTP直接标记，可以在检测过程中验证TUNEL反应的效率。
精确：在分子水平（DNA链断裂）检测细胞凋亡，检测处于凋亡早期的细胞。
灵活：无需底物；可以选择多种染色方法。
包装
1个试剂盒包含3种组分。
原理
In Situ Cell Death Detection Kit, POD是基于对细胞凋亡早期阶段的DNA单链和双链断裂进行检测。
对凋亡细胞进行固定和通透性处理。然后，将细胞置于包含有TdT和荧光素dUTP的TUNEL反应混合液中进行孵育。在此孵育过程中，TdT催化将荧光素dUTP连接到单链或双链DNA的游离3′-OH基团上。进行洗脱步骤之后，用带有过氧化物酶标记的抗荧光素抗体对DNA损伤位点结合的dUTP进行标记。洗脱去除未结合的酶偶联体之后，对免疫复合物留存的POD进行底物显色。
制备说明
储存条件（工作液）：TUNEL反应混合液
TUNEL反应混合液应当在使用前制备，不宜保存。在使用之前应一直置于冰上。
Converter-peroxidase
Converter-peroxidase融化后应保存于2~8 °C 下（最长保存6个月）。
备注： 注意：不要冻存。
样本材料：Cytospin和细胞涂片的准备，玻片上生长的贴壁细胞，以及冰冻和石蜡包埋的组织切片。
