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发布日期:2025/8/14 11:25:00

胰酶和双抗作为细胞培养过程中试剂的一部分,对细胞培养成功与否存在着关键的作用。

 

胰蛋白酶:
胰酶是一种解离试剂,本质是可以降解蛋白的酶,生物学实验中常用来把贴壁细胞从贴壁面解离下来和使细胞解聚,也可以用于原代细胞的传代过程中分散组织。

细胞消化时,胰酶不去除对细胞的影响?细胞消化时,如果消化液中只有胰酶,不含EDTA,不去除是没有问题的。但如果消化液中含有胰酶和EDTA就需要去除。EDTA是一种化学螯合剂,主要作用在于能螯合Ca、Mg离子,使细胞分离。但EDTA不能被血清中和,消化后要彻底清洗去除,否则细胞易脱壁。胰酶胰酶和EDTA联合使用可提高消化效率,所以常二者合用。

 

胰酶使用的时候要注意什么?
1.在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。
2.胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。

 

双抗:双抗就是青链霉素混合液,青链霉素混合液(100X) 。是专门用于细胞培养的,可以直接添加到细胞培养液内。

细胞培养中双抗为什么加青霉素和链霉素?
青霉素和链霉素属广谱抗生素,抗菌谱宽。青霉素阻碍细胞壁合成,导致细胞泄漏;链霉素作用于核糖体,阻碍蛋白翻译。二者作用位点不同。自然环境下(不考虑人为产生的抗药性),对青霉素不敏感的微生物绝大多数对链霉素敏感,反之亦然。两种抗生素搭配可以控制几乎全部常见细菌。

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