基质胶是从EHS小鼠肿瘤中提取的基底膜基质,能在室温下快速聚合,形成模拟体内细胞基底膜的三维支架,给细胞提供“安家”的环境。
核心作用:帮细胞附着、生长、分化,让体外培养的细胞更接近体内真实状态,解决二维培养细胞失活、实验结果不准的问题。
常见类型:
- 标准型(含/不含酚红):适合常规2D、3D细胞培养、血管生成、细胞侵袭等基础实验,不含酚红款适配荧光检测。
- 低生长因子型(GFR):适合对基质成分要求严格的实验,如细胞信号通路研究、类器官培养,减少背景干扰。
- 高浓度型:蛋白浓度高,刚度强,适合体内成瘤实验、血管生成研究。
- 专用型:干细胞用、类器官用,针对性适配特殊细胞培养需求。
基质胶的正确操作步骤:
- 解冻:将基质胶置于冰中,4℃冰箱避光过夜融化(蛋白浓度高时需延长时间),切勿放冰箱门或频繁开启的区域。
- 分装:解冻后涡旋混匀,用预冷移液管按单次用量分装,立即置于-20℃以下避光保存,避免反复冻融。
- 稀释:根据实验需求稀释基质胶(茹成管实验稀释至6-8mg/ml),全程冰浴操作。
- 铺胶:培养板置于冰上,按50μl/cm²的量加入基质胶,均匀铺展。
- 孵育:37℃培养箱中孵育30分钟,待基质胶完全凝固后即可接种细胞。
基质胶使用注意事项:
保存与运输注意事项:
- 保存温度:-20℃或以下避光保存,有效期两年,不可存放于无霜冰箱(自动除霜影响温度)·
- 运输要求:运输要求:干冰运输,到货后若无干冰且基质胶呈凝胶状,及时联系商家。
- 解冻后保存:4℃避光可保持30天左右液态,建议尽快分装或使用。
操作过程注意事项:
- 全程低温:所有接触基质胶的耗材、试剂均需4℃预冷,操作全程冰浴,避免体温导致提前凝固。
- 无菌操作:解冻后在无菌区域操作,瓶身喷洒70%乙醇消毒风干,避免污染。
- 用量控制:根据瓶身标示的蛋白浓度(批次有差异),优化用量以保证实验一致性。
- 颜色变化:冻融过程中可能出现颜色变化,属正常现象,不影响使用。
