N2添加剂在细胞培养中主要作为血清替代品，广泛用于神经细胞和神经干细胞的培养，其核心作用是支持细胞生长、维持未分化状态，并提高培养的稳定性和可重复性。
一、N2添加剂的主要功能与作用机制
促进神经细胞生长与存活：N2添加剂含有胰岛素、转铁蛋白、孕酮、腐胺等关键成分，能够为神经元提供必需的营养支持。例如，胰岛素促进葡萄糖摄取，转铁蛋白负责铁离子运输，这些对能量代谢和细胞功能至关重要。
维持神经干细胞未分化状态：在干细胞扩增过程中，N2添加剂被设计用于抑制过早分化，特别适用于神经干细胞/祖细胞的长期扩增。相比含血清培养基，N2可避免胎牛血清（FBS）中诱导分化的成分干扰，从而更好地保持干性。
选择性抑制非神经细胞：N2添加剂配合Neurobasal等基础培养基使用时，对成纤维细胞等非神经细胞具有选择性抑制作用，有助于提高原代神经细胞培养的纯度。
二、适用细胞类型与典型应用场景
原代神经元培养
特别适用于海马神经元、中枢神经系统（CNS）和周围神经系统（PNS）来源的有丝分裂后神经元的生长与功能维持。
神经干细胞（NSC）培养
常与bFGF、EGF等生长因子联用，在无血清条件下支持神经干细胞增殖。研究显示，含apo-型转铁蛋白的N2配方更能促进神经干细胞增殖。
神经母细胞瘤细胞系
可用于神经瘤细胞的体外培养，支持其稳定生长和表型表达。
三、与其他添加剂的协同使用策略
与B27联用或序贯使用：
在人源神经干细胞培养中，常采用“先B27后N2”的策略——B27用于初始成球阶段以促进存活和恢复，随后切换至N2进行长期扩增，以维持未分化状态。
搭配基础培养基：
推荐与DMEM/F12或Neurobasal培养基联合使用，并根据实验需求添加bFGF、EGF等生长因子，构建完整的无血清培养体系。
