透析的原理是什么?一般需要多长时间才能完成?
1、透析是指溶质在浓度梯度的驱使下,选择性扩散通过半透膜,从而达到大 / 小分子分离,膜两侧浓度平衡,即小颗粒的溶质通过膜,而大分子物质不能通过,被截留在膜另一边。
2、如果将样品置于透析膜管内,通过置换膜管外部的透析缓冲液,可将小颗粒物质清除,从而达到纯化大分子物质的目的。一般来说,一天之内置换 3-5 次缓冲液,然后在室温条件下,放在搅拌台上隔夜透析,即可达到的透析结果。标准的透析操作一般需要 16-24 小时。许多因素会影响透析效率,包括:扩散系数、pH 值、温度、时间、物质浓度、样品体积、透析缓冲液体积、透析缓冲液的置换次数、膜表面积、膜厚度、分子带电荷及缓冲液搅拌速率。
如何选择正确的截留分子量(MWCO)?
截留分子量应该竟可能的大,以使透析速率最大化。但是,为了获得最大的样品回收率,选择的截留分子量应至少为需纯化的大分子物质分子量的一半。对于需对几种分子进行分离的应用,分子之间的分子量差至少为 5 倍,才能完成有效的膜透析。若不能满足分子量差的要求,可能需要使用其它的分离技术,如色谱方法或切向流过滤。
怎样为膜管选择合适大小的膜夹?
1、标准 RC 膜(Spectra/Por 1-7)和生物技术级 RC 膜由柔韧的再生纤维素聚合物制造,可使用任何一种透析膜夹密封。生物技术级 CE & PVDF 膜由相对刚性的聚合物制造,需要使用相对温和的通用膜夹。鉴于通用膜夹对于所有类型的膜管都能起到很好的密封作用,如不确定选择哪种膜夹合适,使用通用膜夹即可。标准膜夹一般只用于标准级RC 膜管。
2、膜夹的密封宽度一般需比膜管的扁平宽度长 4-10 mm。通用膜夹的最小密封宽度为 50 mm。对于所有扁平宽度规格的膜管,均有相应的膜夹可供选择。
