一、使用前准备
选择超滤管：截留分子量应小于目的蛋白分子量的1/3（如35kDa蛋白选10kD超滤管）
预处理：
新管：用双蒸水清洗2-3次，蛋白缓冲液润洗
旧管：纯水冲洗10次，75%乙醇消毒
预冷：冰浴或冰箱预冷2-5分钟
二、操作步骤
加样：
用移液枪加入样品，不超过2mL标记线
有尖角的超滤管需尖角朝上放置
离心：
第一阶段：7500xg离心10-60分钟（固定角转子）
第二阶段：倒转180°，1000xg离心2-3分钟回收残留液
注意：离心机需预冷至4℃，加速度调至最低档
三、使用后处理
清洗：
立即用双蒸水冲洗2-3次
0.1M氢氧化钠浸泡10分钟，纯水冲洗后4℃保存
检查：
浓缩至1mL时，用BSA检测是否漏蛋白
发现效率下降或污染需更换
