简单定义: 一种能够特异性降解胶原蛋白(细胞外基质主要成分)的酶。
来源: 主要从溶组织梭状芽孢杆菌中提取。
核心特点: 不同于胰蛋白酶(只消化细胞间连接蛋白),胶原酶能直接“啃食”胶原纤维,是组织解离的关键。
类型:
胶原酶分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型,要根据所要分离消化的组织类型选择胶原酶类型。
胶原酶Ⅰ:
含有比较均衡的胶原酶、中性蛋白酶、梭菌蛋白酶等。用于上皮、肺,脂肪和肾上腺组织细胞的分离。用于消化组织中连接部分使其成为单个细 胞,用于哺乳动细胞的分离。
特点: 应用最广泛,通用性强。
胶原酶Ⅱ:
含有更高的梭菌蛋白酶活性。适用于肝脏,骨,甲状腺,心脏和唾液腺组织。
特点: 对细胞膜损伤更小,利于原代细胞活性保持。
胶原酶Ⅲ:
包含至少7种蛋白酶成分,分子量从68-130KD不等。它可用于胰腺小岛组织的分离,将结缔组织分离成单个细胞。
特点: 纯度更高,酶活性更“干净”。
胶原酶Ⅳ:
含有极低水平的胰蛋白酶活性,对细胞最温和,适用于对酶敏感的特殊细胞(如肝细胞)。
特点: 纯度更高,酶活性更“干净”。
如何选择:
· 组织结缔组织多 -> 选Ⅱ型
· 组织结缔组织不多 -> 选Ⅰ型(通用)
· 细胞特别娇贵或需要高纯度 -> 选Ⅳ型
*小贴士:很多实验室常用Ⅰ型和Ⅱ型1:1混合的策略,以兼顾消化效率和细胞活性。