预染蛋白Marker与非预染蛋白Marker的核心区别在于染色方式和实验监测功能:预染型通过共价耦联染料实现电泳过程实时可视化,但分子量准确性较低;非预染型需染色后显示,但能精确反映蛋白原始分子量。
预染蛋白Marker的定义与特点
定义:预染蛋白Marker是纯化后的多种蛋白与染料共价耦联形成的混合物,可直接通过肉眼观察电泳进程。
特点:
实时监测:在电泳、转膜(Western Blot)过程中可直接观察迁移状态,便于调整实验参数(如终止电泳时机)。
相对分子量:染料分子可能改变蛋白迁移率,导致条带位置与真实分子量存在偏差。
多功能性:支持转膜效率评估及膜上分子量标记。
非预染蛋白Marker的定义与特点
定义:由已知分子量的纯化蛋白组成,未经染色处理,需通过染色步骤(如考马斯亮蓝)显色。
特点:
高准确性:未耦联染料,分子量显示为蛋白真实大小,误差通常小于±5%。
延迟显示:仅能在电泳后染色阶段观察结果,无法实时指导实验操作。
核心差异对比
原理差异:
预染型:染料与蛋白共价结合,改变电泳迁移特性。
非预染型:保持蛋白天然构象和迁移率。
操作差异:
预染型无需额外染色步骤,节省时间但成本较高(价格通常是非预染型的2-3倍)。
非预染型需染色处理,增加实验步骤但成本较低。
结果呈现:
预染型条带颜色多样(如多色Marker),便于区分相邻条带。
非预染型条带单一,需通过浓度差异或条带间距判断分子量。