腺苷脱氨酶（也称为腺苷氨基水解酶，或ADA，EC 3.5.4.4）是参与嘌呤代谢的酶，其催化腺苷和脱氧腺苷分别不可逆脱氨基为肌苷和脱氧肌苷。这种酶存在于多种微生物、植物、无脊椎动物、脊椎动物和哺乳动物。腺苷脱氨酶基因中的一些突变会导致它不被表达。由此产生的缺陷是严重联合免疫缺陷（SCID）的原因之一，特别是会伴随常染色体隐性遗传。ADA水平不足也与肺部炎症，胸腺细胞死亡和T细胞受体信号缺陷有关。相反，导致该酶过度表达的基因突变是溶血性贫血的原因之一。
底物腺苷在腺苷脱氨酶（ADA）作用下水解为肌苷（也称次黄嘌呤核苷），肌苷在嘌呤核苷磷酸化酶（PNP）催化下水解，生成次黄嘌呤和磷酸核糖。次黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶（XOD）作用下产生过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶（POD）、 4-氨基替比林及色源的作用下，产生紫红色物质，在波长550 nm 处有最大吸收，检测单位时间内紫红色物质产生的速率可以得到腺苷脱氨酶活力大小。
