Thermo Scientific Pierce DAB 底物试剂盒能够基于 3,3'-二氨基联苯胺 (DAB) 在 Western 印迹和组织染色方法中的作用进行辣根过氧化物酶 (HRP) 活性的发色检测。
DAB(3,3'-二氨基联苯胺盐酸盐;MW = 214.1)在存在过氧化物的条件下与 HRP 反应,在过氧化物酶偶联抗体与样品结合的位置产生不溶性棕色产物。棕色沉淀不溶于酒精和其他有机溶剂,因此是需要使用传统的复染剂和封片剂的免疫组织化学染色的绝佳底物。Pierce DAB 底物试剂盒包括 10X DAB 溶液和稳定过氧化物底物缓冲液。也可提供结晶 DAB(粉末)。
DAB 底物特点:
•HRP 底物—用于检测固体培养基上的辣根过氧化物酶活性,包括硝酸纤维素和 PVDF 膜及固定的组织样品
• 发色—无需使用特殊设备即可进行可视化;DAB 反应在与 HRP 偶联抗体或探针反应的位点产生棕色条带或斑点
• 包装选项—选择粉末用于含缓冲液和过氧化物的定制配方,或选择预配溶液的全套试剂盒供立即使用
Pierce DAB 底物试剂盒的特点:
•易于使用—在提供的稳定过氧化物缓冲液中将 10X 储备液稀释至 1X
• 更安全—预先配制的 DAB 溶液与该化学品配合使用可尽可能减少安全性问题
• 完整—包括便利的稳定过氧化氢缓冲液溶液(产品编号 34062)
• 稳定—在 4°C 下冷藏储存至少一年;无需冷冻储存
DAB 已用于各种应用,包括 Western 印迹、免疫组织化学技术和电子显微镜检查。已报告了涉及不同缓冲液条件、添加金属离子和处理后应用的用于 DAB 的许多增强方法(参考文献 1-7;另见 Pierce 金属增强型 DAB 底物试剂盒,产品编号 34065)。DAB 与其他底物相比的缺点之一是需要立即使用工作溶液,因为它在添加过氧化氢时开始反应过程。这导致底物的背景颜色增加。然而,DAB 反应产生的棕色条带不会像其他沉淀 HRP 底物的颜色产物那样快速褪色。