关注公众号
请登录 免费注册
人白介素6(IL-6 )ELISA Kit
货号 规格 品牌 库存 市场价 会员价 加入购物车
AE90247Hu-48T 48T AMEKO
¥1300.00
AE90247Hu-96T 96T AMEKO
¥2200.00

本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中白介素6(IL-6 )的含量。

有效期:6个月

保存条件:2-8℃

实验原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被白介素6(IL-6 )捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白介素6(IL-6 )呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

样本处理及要求

1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

3. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。

需要而未提供的试剂和器材

1. 酶标仪(450nm)

2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒温箱

4. 蒸馏水或去离子水

试剂准备

试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。

20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

操作步骤

1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

 

注意事项

1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。

2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。

3. 消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。

4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。

5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。

6. 在储存和温育时避免强光直接照射。

7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。

9. 不能使用过期产品。

10. 如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。

洗板方法

手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。根据需要,重复此过程数次。

自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。

实验结果计算

以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。

象形图
警示语
Class
警告声明
UNub
危险声明
Packing Group
搜索质检报告(COA)
搜索MSDS

相关产品

大鼠AKT蛋白(AKT)ELISA Kit,双抗夹心法
加入购物车
绵羊瘦素(LEP)ELISA Kit,双抗夹心法
加入购物车
绵羊胰岛素(INS)ELISA Kit,双抗夹心法
加入购物车
绵羊胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA Kit,双抗夹心法
加入购物车
绵羊糖皮质激素(GC)ELISA Kit,双抗夹心法
加入购物车
绵羊促卵泡生成素(FSH)ELISA Kit,双抗夹心法
加入购物车
绵羊催乳素(PRL)ELISA Kit,双抗夹心法
加入购物车
绵羊胰高血糖素(GC)ELISA Kit,双抗夹心法
加入购物车
视黄酸(RA)ELISA Kit竞争法
加入购物车
小鼠游离甲状腺素(fT4)ELISA Kit,双抗夹心法
加入购物车
大鼠转录因子Gli2(Gli2)ELISA Kit,双抗夹心法
加入购物车
大鼠微管相关蛋白轻链3B(LC3B) ELISA Kit,双抗夹心法
加入购物车
大鼠PTEN诱导假定激酶1(PINK1) ELISA Kit,双抗夹心法
加入购物车
大鼠Parkin蛋白(Parkin) ELISA Kit,双抗夹心法
加入购物车
大鼠三叶因子1(TFF1) ELISA Kit,双抗夹心法
加入购物车
大鼠p62(p62)ELISA Kit,双抗夹心法
加入购物车
牛乳乳铁蛋白(LTF)ELISA Kit,双抗夹心法
加入购物车
小鼠血清白蛋白(ALB)ELISA Kit,双抗夹心法
加入购物车
大鼠瓜氨酸(cit)ELISA Kit,双抗夹心法
加入购物车
人自噬相关蛋白LC3-I(LC3-I)ELISA Kit,双抗夹心法
加入购物车
顶部